对于荧光PCR检测试剂盒很多人做过不少的了解,但还是要跟大家再分享一下,本产品的特性和原理和作用流程:
高灵敏度:它可以量化低拷贝或多样性模板。
特异性强:利用热启动酶的激活机制抑制非特异性扩增。
重复性好:放大曲线符合度高,受干扰影响小。
放大效率高:放大曲线CT值低,峰值启动快,效率高。
原理:所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号的积累实时监控整个PCR过程,然后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
荧光PCR检测试剂盒操作流程:
1、整个检测过程应严格按照本手册的要求在试剂制备区、样品处理区和PCR扩增区进行操作。各区域的实验服、仪器、耗材应单独使用,不得混用;实验采用带滤芯的吸入头;样品处理区应配备生物安全柜,样品处理应在生物安全柜内进行;三个区域应配备紫外线灭菌装置。
2、为了避免RNA降解,样品处理过程应在0-4℃下操作,并在实验后立即进行测试;样品处理中使用的仪器和耗材应不含核酶。
3、每次实验应设阴性对照和阳性对照。
4、试剂盒中的所有试剂在使用前应在室温下充分熔化和混合,并应立即离心。
5、试剂盒中的所有阴性对照品和阳性对照品应转移到标本制备区,并在一次使用前单独存放。
6、为防止荧光干扰,避免徒手直接接触PCR反应管,避免PCR反应管上有任何标记。