ELISA是一种基于免疫反应的高灵敏度实验技术,将抗原和抗体的特异性反应与酶在底物上的高效催化结合起来。
1、操作前应充分了解试验的物理参数,如环境温度、反应培养温度和培养时间、洗涤次数等。应首先检查水培养箱温度和ELISA试剂盒是否符合要求。
2、要保证加液量。当我们使用它时,我们觉得滴瓶不如采样器好。滴水瓶不容易控制。禁止添加液体量,导致显色不一致和判断故障。
3、正确使用取样器。取样器应直接接触样本或试剂,以避免刮伤涂层板的底部。采样过程中,避免液体飞溅和血清残留在反应孔壁上。应清洁取样器的吸入头,以避免污染。采样顺序应与说明书一起,否则可能导致效果错误和测试重复性差。
4、显色液用量不宜过多。添加样品的工作环境不应在阳光直射下。加入显色体系后,避免光反应。显色液的用量不宜过多,以免显色性强。
5、手动清洗板和添加清洗液时,冲击力不宜过大。清洗时间不得超过说明书中建议的清洗时间。洗涤液不应在反应室内停留太久。不要使乳液在毛孔之间流动,形成毛孔污染,造成假阴性或假阳性。
生长因子ELISA试剂盒使用时容易出现误差是什么原因:
1、由于不同厂家生产的试剂盒的生产工艺和操作方法略有不同,因此必须严格操作所使用的试剂盒,否则容易产生测试结果的不确定性
2、如果不同批次的人ELISA试剂盒的不同成分(一种溶液或酶工作液)或不同试剂的不同成分交叉使用,可能会出现浅色或高背景、花板等情况。
3、反应时间误差。在制作大量样品时,第一个孔和下一个孔以及一些特殊样品可能会产生很大的影响。
4、样品在临界值附近波动是正常现象,任何试剂都是不可避免的。可以考虑对样本进行奇数次复查。