细胞培养是大多数生物实验室遇到的基本实验,但不是简单的实验。细胞培养包含大学问题。相信每个细胞培养者都遇到过细胞培养的不良状态。有时细胞状态不好,不可能做转染和药物筛选等实验。影响细胞培养的因素很多,但第一个因素是选择合适的细胞培养基。
细胞*培养基是在体内人工模拟动物细胞生长环境,在体外维持细胞存活和增殖的营养基础。其主要功能是为细胞提供合适的pH和渗透压,以及细胞自身无法合成的各种营养素。完整培养基是指添加了各种添加剂的培养基,包含培养基的所有成分,能够满足特定细胞生长的需要。通常使用成分有限的培养基进行配置,使用前添加一些不稳定成分,如谷氨酰胺、各种补充剂、血清、生长因子或激素。
细胞*培养基的主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。人工合成培养基使用时还需添加一定量的血清使细胞生长和繁殖。这些成分的作用如下:
氨基酸:组成蛋白质的基本单位。不同的细胞对氨基酸有不同的需求,但一些必需氨基酸不能由细胞自身合成,必须由培养基提供。剩余的非必需氨基酸可以由细胞自身合成或通过转氨作用从其他物质转化。
葡萄糖:大部分培养基都以葡萄糖作为能量来源之一。
无机盐:维持培养基渗透压平衡,参与细胞的代谢活动。
维生素:一种维持细胞生长并在细胞代谢中起重要作用的生物活性物质。它们大多数形成细胞中酶的辅助基团或辅酶。没有它们,酶将没有活性,代谢活动将无法进行。维生素分为水溶性和脂溶性。