白介素从分子结构来看,其都是小分子的多肽,多数由一百个左右氨基酸组成。白细胞介素都是通过与靶细胞表面的细胞因子受体特异性结合来发挥其生物学效应,这些效应包括促进靶细胞的增殖和分化,增强抗感染和杀伤肿瘤细胞效应,促进或抑制其他细胞因子合成,促进炎症过程,影响细胞代谢等。
1、灵敏度:有二层含义,一为试剂检出被检物质的低量的能力;二为试剂对大量样品中阳性检出的能力。
2、特异性:常用交叉反应率表示。含有与待测物相近结构部分的物质可能存在交叉反应,使测定结果升高,可能导致假阳性,所以交叉反应是评价其质量的关键指标。
3、精密度:一般指其批内CV%,其值应小于15%;定量试剂应同时考察线性范围。
4、准确度:通过添加回收实验进行评价。
5、安全性:指试剂对操作者和环境安全无害无传染性。
6、经济性:试剂在同等质量条件下通过大规模生产或技术进步降低成本,而市场价格比较合理。
白介素ELISA试剂盒的正确使用需要留意以下这些问题?
实验时,要使底物避光保存。底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。检测前,要打开酶标仪,使之稳定十分钟以上。待检样品要澄清,否则会影响结果。
用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。温浴时间应遵守试剂盒规定。
洗板时,每次洗液加入后,应静置一分钟,使清洗更加好。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
应尽量做双孔实验,这样才能保证数据的准确性。