人肺大静脉平滑肌细胞
产品名称 ：人肺大静脉平滑肌细胞
产品货号 ：YLK-XB0518h
组织来源 ：肺静脉组织
产品规格 ：5×105cells/T25细胞培养瓶
细胞简介：
人肺大静脉内皮细胞分离自肺大静脉组织。肺大静脉在用肺呼吸的脊椎动物中，把动脉血由肺送回心脏的静脉，是唯yi一个静脉里流动脉血的血管。左右1对，共4条，两条连接右肺，两条连接左肺。肺静脉异位引流是指肺静脉未能直接与左心房连接，而与右心房或体静脉系统连接的先天性心血管异位。
肺静脉淤血性肺动脉高压，是由于肺静脉内血液淤滞而引起的肺动脉高压。正常情况下，肺循环具有血压低、阻力小和顺应性大的特点，肺动脉压力高低取决于单位时间内肺动脉血流量和肺血管的阻力，要维持肺循环的低压、低阻的状态，必须保证整个肺循环系统的畅通无阻，血液顺利地由肺动脉经毛细血管进入肺静脉，再入左心室，经过左心室收缩进入体循环，才能避免肺动脉内压力升高。
肺大静脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中。2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏。细胞密度低时，常交织成网状。密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。该细胞参与血管壁炎症反应，保持静脉管腔的通畅，还是多数动脉疾病的靶细胞。
质量检测
优利科生物实验室分离的该细胞经Vim entin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息
培 养 基 ：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 ：每2-3天换液一次
生长特性 ：贴壁
细胞形态 ：成纤维细胞样
传代特性 ：可传5代左右。3代以内状态最佳
传代比例 ：1:2
消 化 液 ：0. 25% 胰蛋白/酶
培养条件 ：气相 ：空气，95% 。C O2，5%
该细胞体外培养周期有限。建议使用优利科生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作
1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白/酶消化液，37℃温浴1-3min。倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完培终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完培至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4) 待细胞贴壁后，培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完培。
3. 细胞收货脱落
1) 收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)。消化完向离心管内加入5ml完培终止消化。
3) 经1000rpm离心5min丢弃上清，用5ml完培基重悬沉淀，接种于新的培养瓶内。
4) 待细胞贴壁后，培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完培(37℃预热)。
5) 原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中，胰/酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
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