大鼠牙胚细胞
产品名称 ：大鼠牙胚细胞
产品货号 ：YLK-XB1262h
组织来源 ：牙胚组织
产品规格 ：5×105cells/T25细胞培养瓶
细胞简介：
牙胚细胞分离自牙胚组织；牙胚是牙齿最开始发育阶段的形态，是由牙板向深层的结缔组织内伸延，在其最末端细胞增生，进一步发育成牙胚。牙胚有三部分组成：
①成釉器(enam elorgan)，起源于口腔外胚层，形成釉质；
②牙乳头(dentalpapilla)，起源于外胚层间充质，形成牙髓和牙本质；
③牙囊(dentalsac)，起源于外胚层间充质，形成牙骨质、牙周膜和固有牙槽骨。牙胚的发生是口腔上皮和外胚间充质相互作用的结果。在胚胎的第5周，覆盖在原口腔的上皮由两层细胞组成，外层是扁平上皮细胞，内层为矮柱状的基底细胞。在未来的牙槽突区，深层的外胚层间充组织诱导上皮增生，开始仅在上下颌弓的特定点上，上皮局部增生，很快增厚的上皮相互连接，依照颌骨的外形形成一马蹄形上皮带，称为原发性上皮带。在胚胎的第7周，这一上皮带继续向深层生长，并分裂为两个：向颊(唇)方向生长的上皮板称前庭板，位于舌(腭)侧的上皮板称为牙板(dentalla mina)。在胚胎的第8~10周，前庭板继续向深层生长，与发育的牙槽嵴分开，前庭板表面上皮变性，形成口腔前庭沟。
质量检测
优利科生物实验室分离的该细胞经Vim entin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息
培 养 基 ： 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 ： 每2-3天换液一次
生长特性 ： 贴壁
细胞形态 ： 梭形、多角形
传代特性 ： 可传3代左右
传代比例 ： 1:2
消 化 液 ： 0.25% 胰蛋白/酶
培养条件 ： 气相：空气，95% ；C O2，5%
该细胞体外培养周期有限。建议使用优利科生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作
1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白/酶消化液，37℃温浴1-3min。倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完培终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完培至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4) 待细胞贴壁后，培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完培。
3. 细胞收货脱落
1) 收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)。消化完向离心管内加入5ml完培终止消化。
3) 经1000rpm离心5min丢弃上清，用5ml完培基重悬沉淀，接种于新的培养瓶内。
4) 待细胞贴壁后，培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完培(37℃预热)。
5) 原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中，胰/酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
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