详细介绍
品牌 | YLKBIO | 货号 | YLK10413P |
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规格 | 50T | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 科研实验 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
保存条件 | 低温运输,-20℃保存 | 有效期 | 12个月 |
试剂盒说明 | 不同批号的试剂盒组分不可交互使用 |
猪脑心肌炎病毒RT-PCR检测试剂盒
产品名称:猪脑心肌炎病毒RT-PCR检测试剂盒
脑心肌炎病毒(Encephalomyocarditis Virus,EMCV)在分类上属小 RNA 病毒科,心肌病毒属,是一种无囊膜的单股正链 RNA 病毒。由 EMCV 引起的猪脑心肌炎是猪的一种以脑炎、心肌炎或心肌周围炎为主要特征的急性传 染病,给养猪业造成了极大的经济损失。本产品适用于检测猪血清、脑、心肌以及 淋巴结等组织标本或病毒培养液中 EMCV 的 mRNA,适用于 EMCV 感染的辅助诊断。它具有下列特点:
1. 用于 EMCV 的定性鉴定检测和分子流行病学调查。
2. 能对样品中 EMCV 进行快速检测,具有良好的特异性和敏感性。
3. 使用一管式 RT-PCR 试剂盒,减少了操作步骤,降低了操作误差。
【试剂组成】
成分 | 50 次热封袋包装 |
双酶一管式 RT-PCR Buffer,2× | 750 μL |
MMLV-Taq Mix | 100 μL |
EMCV 专一性引物对 | 200 μL |
EMCV 阳性对照 | 50 μL |
超纯水 | 1 mL |
使用手册 | 1 份 |
【运输及保存】
低温运输,-20℃保存,保存期限一年。
【自备试剂】一管式病毒 RANout 或柱式病毒 RNAout
【注意事项】
一、样品 RNA 的制备
用自选方法纯化 EMCV 样品的 RNA ,也可以另购本公司的一管式病毒RANout 或柱式病毒 RNAout,上述两款产品跟本试剂盒兼容。
二、阳性对照
1. 为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对 照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 使用本阳性对照时,由于其浓度较高,一定要注意不要污染其他试剂和成分。最 好在专门的区域操作。
三、设置 RT-PCR 反应(30 uL 体系)
3. 在 PCR 管中加入下列成分:
成 份 | 样品 | 阳性对照 | 阴性对照 |
双酶一管式 RT-PCR Buffer,2× | 15 uL | 15 uL | 15 uL |
EMCV 专一性引物对 | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
样品 RNA | 1-5 uL | 无 | 无 |
EMCV 阳性对照 | 无 | 2 uL | 无 |
补超纯水到 | 28 uL | 28 uL | 28 uL |
MMLV-Taq Mix | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
4. 轻柔混匀后上机,按下面参数进行 RT-PCR。
过程 | 温度 | 时间 |
逆转录 | 60℃ | 30 分钟 |
预变性 | 94℃ | 5 分钟 |
PCR 反应
(30 个循环) | 94℃ | 30 s |
55℃ | 30 s | |
72℃ | 30 s | |
延伸 | 72℃ | 5 分钟 |
5.电泳检测 RT-PCR 产物。预期的PCR 产物长度为 286 bp。
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